產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增番瀉葉，與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。
規(guī)格及成分：
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編號(hào)
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成分
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規(guī)格
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試劑一
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PCR MagicMix 3.0
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1 mL（紅蓋）
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試劑二
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超純水
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1 mL（亮黃色）
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試劑三
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番瀉葉PCR鑒定引物混合液
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100 μL（白蓋）
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試劑四
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番瀉葉PCR鑒定陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8/μL）
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50 μL（黃蓋）
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試劑五
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使用手冊(cè)
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1 份
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運(yùn)輸及保存：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
番瀉葉PCR鑒定試劑盒
使用方法：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容?？梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加10μL番瀉葉PCR鑒定陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）：
3. 對(duì)N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：
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成份
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N+2 個(gè)樣品管
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PCR 陰性對(duì)照
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PCR陽(yáng)性對(duì)照
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PCR Magic Mix 3.0
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各 20μL
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20μL
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20μL
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番瀉葉PCR鑒定引物混合液
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各 2μL
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2μL
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2μL
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N+2個(gè)樣品DNA模板
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各18μL
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--
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PCR陰性對(duì)照（水）
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18μL
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PCR陽(yáng)性對(duì)照（番瀉葉PCR鑒定陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液）
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--
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--
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18μL
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4.按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：
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過(guò)程
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溫度
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時(shí)間
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預(yù)變性
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95℃
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5 min
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PCR 反應(yīng)（35 個(gè)循環(huán)）
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95℃
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30 sec
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55℃
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30 sec
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72℃
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40 sec
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延伸
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72℃
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7 min
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三、電泳檢測(cè)：
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。
