產品詳情
簡單介紹：
公司所有產品生產出廠前均做過大量人和動物實驗標本的檢測工作，線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ測試盒公司在強化產品質量管理和優(yōu)化生產流程管理上一直在努力進步！
詳情介紹：
線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
線粒體復合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,由F1和F0兩個亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產生的質子電化學梯度催化ATP合成,也可逆過程水解ATP。此外,復合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養(yǎng)菌和光合中。復合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關鍵酶。
測定原理:
復合體Ⅴ水解ATP產生ADP和Pi,通過測定Pi增加速率來測定復合體Ⅴ活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
組織、或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①準確稱取0.1g組織或收集500萬細胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的復合體Ⅴ(此步可選做)。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體,加入800uL試劑二和8uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復30次),用于復合體Ⅴ酶活性測定。
